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如何選擇高效液相色譜儀中的反相色譜緩衝液
發布時間:2019-12-21   點擊次數:798次
 
  通過HPLC分離的樣品可根據其在分離係統(或流動相)中的狀態分成中性樣品和離子樣品所謂中性樣品是在分離條件下不能離解的化合物,而離子化合物可以離解離子。換句話說,離子樣品指的是酸堿化合物,而中性化合物是其它化合物。
  反相色譜(RPC)主要是基於待分離化合物的極性。在其它類似條件(分子量、空間結構)下,強極性物質的保留值較小。對於中性樣品,其極性取決於化合物本身,但對於離子化合物,其極性可以通過調節其是否離解或離解程度來調節,從而調節其保留值、分辨率和主鏈效應(一般來說,保留值的提高將導致骨幹效應的提高)。
  在分離含有少量化合物的樣品的情況下,通常可行的是使用無鹽流動相(無論全部或部分化合物不是中性的)。由於需要分離的化合物較少,分離度的要求不太重要,通過調節流動相的洗脫容量和流速可以實現保留值的調節。...此時,您需要嚐試使用SALT移動階段,即使用緩衝區。但是,用無鹽流動相分離多組分樣品比較困難。當然,如果樣品中的所有化合物都是中性化合物,則很難使用鹽流動相,但這次較少。因此,如果無鹽緩衝液在分離多組分樣品時效果不好,應首先考慮鹽的流動相。
  緩衝液是在一定條件下提供共軛酸堿對並穩定pH值的溶液。利用緩衝液控製分離過程中的pH值,控製化合物的離解程度,從而調節化合物的極性。  
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